瑞士RegenHU打印機—活細胞組織三維打印制造*強音

活性細胞組織存活率99%以上！！

常溫、高低溫等打印材料廣泛！！

接近體內自然環境的打印微環境*限控制！！

打印速度*快！！

瑞士RegenHU公司目前主要有兩款產品，分別為3DDiscovery 和BioFactory系列。這兩款產品都是生物打印領域中具有高性價比的3D生物打印平臺，可以幫助研究者通過生物打印方法對有潛力的三維組織工程方法、材料、集成技術等進行研究。

瑞士RegenHU品牌3DDiscovery生物打印系統

系統主要亮點優勢

1.打印頭類型豐富

具有細胞友好型室溫打印頭、可溫控細胞打印頭、高粘度打印頭、高溫材料打印頭、兩組分打印頭、熔體靜電紡絲寫入打印頭等類型豐富的打印頭，使細胞打印材料打印頭各司其職，保障材料應有廣度的同時提高了細胞打印存活率

2. 多種打印方式

非接觸式噴射打印（ink Jetting）、針式接觸點膠打印，使噴射、擠出動作符合

生物力學要求，同時又能減少污染機會*限降低污染、*大提高細胞存活率

3.靜電紡絲技術和3D生物打印**結合

可以將超細纖維支架和水凝膠的結合起來，由此生物打印而成的三維結構無論是剛度和彈性都類似于人類自然生長. 該方法有助于提供用于細胞生長的空間，同時還有助于細胞所需要的機械剛性。*終打印出的結構不盡能夠實現自然**，而且有助于促進新組織的生長。

4.高精度、分辨率高

打印液滴分配控制軟件Liquid Dispensing和納升級別的細胞打印頭提高了存活率

可以**控制水凝膠噴射位置和墨水的量，有利于生物顯微結構的建立，有利于局部痕量供給生物活性因子及**，從而有利于控制組織的局部生長發育。目前已經成功構建成功皮膚、肺泡、軟骨、肌腱、骨骼和多種組織類型，打印成功的組織類型遠遠多于其他產品。

5.專業生物打印軟件： BioCAD、BioCAM、BioCUT 和HMI軟件，簡介易用、兼容X射線，CT，核磁共振，超聲等各種掃描成像設備圖像三維建模，文件轉換**，確保后期打印精度;HMI生物打印軟件可以同時對多個打印頭的參數進行輸入，如打印材料，噴頭直徑、加熱情況、噴射點距、定位參數，可以識別打印STL, DICOM, AMF, DXF、OBJ、3MF等各式模型文件。

6.氣壓、液滴打印頭微閥二次控制

獨有氣壓、液滴的打印頭微閥二次控制，符合打印生物力學要求再次提高細胞存活率

7. 一體化的超強的BioSafety無菌微環境控制能力

 HEPA H14高效過濾網 (RNA/DNA操作潔凈度)，再次保障了生物打印無菌、高村率特性

8.打印速度快：5至200mm /秒

9.主機支持的打印頭加料倉數量：支持打印8種介質，可升級多材料混合打印頭

10.適合多種生物材料

10.1聚乳酸（PLA）、聚乙醇酸（PGA）、聚乙二醇衍生物（PEG）、纖維蛋白、彈性蛋白（韌帶及真皮中）、膠原蛋白、海藻酸鈉、瓊脂糖等。

10.2)天然生物衍生材料，如脫鈣骨基質、殼聚糖、藻酸鹽凝膠等；

10.3）人工合成生物高分子材料，主要有羥基磷灰石、磷酸三鈣、生物活性玻璃等無機材料和以聚乳酸及其共聚物等為代表的有機材料。

10.4)聚己酸內酯，磷酸鈣和水凝膠基體來形成生物相容性良好的骨骼

11.電紡絲與3D生物打印**集合

12.專業強大3D打印控制和生物醫學3D創建模型軟件套件：

BioCAD、BioCAM、BioCUT強大專業軟件可直接讀取包括CT、MRI、超聲在內的各種醫療成像設

備掃描的患者數據，可識別打印STL、DICOM、AMF、DXF、OBJ、3MF等各式模型文件并創建三

維模型，用于模型制作、參數識別控制打印

主要參數：

桌面機外形尺寸：580 x 540 x 570mm

機械手臂精度：5μm

制作范圍：130x90x60mm

打印倉個數：*多可支持8個加料倉（4個2C=PH兩組分打印頭）

打印頭類型豐富：室溫細胞打印頭、溫控細胞打印頭、高粘度打印頭、高溫材料打印頭、

兩組分打印頭、靜電紡絲打印頭

高粘度打印頭粘度范圍：50-20’0000mPaS

細胞打印頭粘度范圍：110-1000mPa.s

射出精度達: nl

專用打印控制與建模軟件: BioCAD、HMI，可選配的BioCAM、BioCUT軟件

制作盤溫可溫控：5 ℃~ 80 ℃

BioSfety微環境控制**柜：（可選配）

外形尺寸：2.4m高 × 1.37m寬 ×1.03m 厚

壓力：0.6MPa的-1兆帕            排量：108升/分鐘

排氣氣流：338 CFM（574 CMH）     操作性能：僅供室內使用：

環境溫度范圍：15°C-30℃         環境濕度：20％-60％相對濕度

重量：550公斤

細胞打印頭溫度范圍：5 ℃~ 80 ℃

電紡絲打印頭溫度和電壓：可達80℃，高壓電源可達25kV

高溫材料打印頭溫度范圍：室溫到240℃

專用的打印材料：BioInk^TM生物高相容性水凝膠與 OsteoInk^TM骨科打印耗材

低溫范圍：0-5℃

光固化系統：細胞兼容性波長：365nm±10nm

---功率：360mW

不同型號的打印頭適合于不同的材料類型

?    CF300N/H打印頭主要適合于友好型細胞打印：

如胚胎干細胞(Embryonic stem cell)、脂肪干細胞(Adipose derived stem cell)、骨髓間充質干細胞(Bone marrow stem cell)、肝細胞(Liver cells)、腫瘤細胞(Tumor cell)

?    DD135打印頭主要適合于骨組織修復和再生材料的高粘度材料打印：

如羥基磷灰石（Hydroxyapatite）、磷酸三鈣（Tricalcium phosphate）、珍珠質（Nacre）

?    CF300N/ CF300H以及DD135均適合于軟組織支架材料的打印：

如明膠(Gelatine)、藻朊酸鹽(Alginate)、纖維蛋白(Fibrin)、膠原(Collagen)、瓊脂(Agar)、聚氨基葡萄糖(Chitosan)

?    HM300H主要適合于可加熱材料的打印：

如聚乳酸(PLA)、乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)、聚乙酸內脂(PCL)、羥基乙酸淀粉鈉(Sodium Starch Glycolate),包括硅酮(Silicones)、聚氨酯(Polyurethane)等

?    MESW靜電紡絲打印頭合適于超細纖維支架網絡和水凝膠的結合（使用非常細的纖維組成的網絡來加固軟凝膠）的打印

靜電紡絲技術和3D生物打印相結合，可以將超細纖維支架和水凝膠的結合起來，由此生物打印而成的三維結構無論是剛度和彈性都類似于人類自然生長

?    2C-PH兩組分細胞友好型打印頭合適多種材料的打印

可以使2個加料倉公用一個打印頭，可以一次性多種加料，減少因換料引起的污染

BioCAD:主要用于快速構建生物組織和支架模型，構建速度快，可在1-2小時內迅速掌握

BioCAM: 主要用于將外在的STL文件快速轉化為可識別的打印文件，軟件容易操作，文件轉換**，確保后期打印精度

BioCUT: 主要用于將CT和核磁共振的三維數據轉化為可以打印的文件模式，便于醫生和研究者根據實際情況定制 

醫學上3D 打印關鍵一步也是一個高成本長時間的過程，就是創建三維模型。通過CT、MRI、超聲和正電子發射斷層顯像等醫學影像手段的各種醫療設備掃描患者，獲取患者的數據，然后，通過BioCAD、BioCAM、BioCUT專門的計算機建模軟件創建三維模型， *后整理輸出為打印機識別的文件進行打印，大大減低模型建立的時間成本和人力成本。

相關文獻案例 

(1) Kajsa Markstedt et al. 3D Bioprinting Human Chondrocytes with anocelluloseAlginate Bioink for Cartilage Tissue Engineering Applications. Biomacromolecules2015 Accepted.
文章介紹了利用軟骨細胞和纖維素－海藻酸鈉配成的生物墨水來打印人體的軟骨組織及應用（3DDiscovery打印機）。

圖3-6 文章相關數據及圖片

ABSTRACT: In this study a bioink that combines the outstanding shear thinning properties of nanobrillated cellulose (NFC) with the fast cross-linking ability of alginate was formulated for the 3D bioprinting of living soft tissue with cells. Printability was evaluated with concern to printer parameters and shape delity. The shear thinning behavior of the tested bioinks enabled printing of both 2D gridlike structures as well as 3D constructs. Furthermore anatomically shaped cartilage structures such as a human ear and sheep meniscus were 3D printed using MRI and CT images as blueprints. Human chondrocytes bioprinted in the noncytotoxic nanocellulose-based bioink exhibited a cell viability of 73% and 86% after 1 and 7 days of 3D culture respectively. On the basis of these results we can conclude that the nanocellulose-based bioink is a suitable hydrogel for 3D bioprinting with living cells. This study demonstrates the potential use of nanocellulose for 3D bioprinting of living tissues and organs.

（2）Markus Rimanna et al. 3D Bioprinted Muscle and Tendon Tissues for Drug Development. Chimia 69 (2015) 65–67

圖3-7 打印后的組織結構的照片 
蘇黎世大學**開發和物質測試中心運用RegenHU打印機（3DDiscovery打印機）進行了測試。文章介紹了打印主要人類成肌細胞和鼠肌腱細胞。**組織化學染色顯示打印后的成肌細胞在分化培養的七天后成為肌球蛋白重鏈(綠色)，顯示肌肉橫紋特征和多核細胞。A1A2顯示了整個打印后的組織結構的照片。B1B2打印的鼠肌腱細胞在分化培養5天后顯示特有的成熟肌腱膠原蛋白。肌腱膠原I環繞在細胞核周圍。
圖3-8 骨骼肌細胞和肌腱細胞打印成組織后的增殖情況
（3）Markus Rimann et al. Standardized 3D Bioprinting of Soft Tissue Models with Human Primary Cells. Journal of Laboratory Automation 2015 1–14
文章報道了使用人的原始細胞來進行皮膚軟組織的三維打印培養（3DDiscovery打印機）。成纖維細胞被交替打印在bioink支架中并進行長達7周的培養。成纖維細胞完全填充在bioink支架中，活性良好并擴展到整個支架中。原代人皮膚角質細胞接種在成纖維細胞形成的這種結構中，形成了真皮特有的表皮樣結構，這是**次對該類型的三維組織進行報道。


圖3-9 成纖維細胞完全填充在bioink支架中，活性良好
（4）Kristin Schacht et al. Biofabrication of Cell-Loaded 3D Spider Silk Constructs. Angew. Chem. Int. Ed. 2015 54 2816 –2820

圖3-10蜘蛛絲蛋白水凝膠生成的三維細胞加載結構 
生物墨水的生物印刷適應性是生物打印的目前*大的瓶頸之一。文章報道了使用了重組蜘蛛絲蛋白作為生物墨水，發現其具有能夠對細胞生存和增殖具有良好的適應能力，不需要交聯劑、機械穩定添加劑或增稠劑。在這項研究中 重組蜘蛛絲蛋白水凝膠可以自動生成的三維細胞加載結構，證明重組蜘蛛絲水蛋白凝膠在生物打印中具有良好的應用前景。 
BioFactory三維生物打印機系統介紹
瑞士RegenHU BIOFACTORY是目前已知的三維打印機**能*為強大的生物打印機，產品一經推出，立即受到組織工程領域的科學家的重視。其強大的動力系統、獨特的轉盤式選擇定位系統、可擴展到8只打印頭的材料選擇平臺，都為科學家的研究能力增加了強大的保障。

瑞士RegenHU BIOFACTORY活細胞組織三維打印制造*強音

1、BioFactory系統動力系統介紹 

圖4-2 BioFactory系統動力系統綜合介紹 

圖4-3 BioFactory可擴展到8只打印頭
BioFactory*大可以擴展到8只打印頭，支持五種打印方式，讓打印的組織賦予更多功能，可以構建更為復雜的組織；

圖4-4 **的三軸組合移動平臺，打印精度更高

2、BioFactory配置不同型號的打印頭 
配備多達5種不同型號的打印頭，可以實現組織工程支架打印、細胞打印和對高分子，如蛋白質和多種有機大分子的打印。

1. CF300N (non heated)

2. CF300H (heated)

3. DD 135N

4. CF130N

5. UVPen-365

圖4-5 BioFactory可實現組織工程支架打印、細胞打印較和生物大分子打印
3、BioFactory的適應性生物材料、生物墨水 

圖4-6 BioFactory適應多種水凝膠和高分子材料 
達到200多種材料，涵蓋牛頓力學和非牛頓力學材料，粘度在20–30000mPas之間都可以。

4、BioFactory打印環境控制能力 
Flow box提供了**功能，可以控制溫度、濕度、光照、氧氣/二氧化碳濃度。

圖4-7 BioFactory的Flow box

5、BioFactory的主要優勢

1. 高精度：可以**控制水凝膠噴射位置和墨水的量，有利于生物顯微結構的建立，有利于局部痕量供給生物活性因子及**，從而有利于控制組織的局部生長發育。

2. 可以同時打印8種細胞和支架材料，更利于整體三維結構的構建，從而實現同時打印組織/器官內的不同組分，使用不同的細胞、細胞外基質和生物活性因子，并且使用**的配比。

3. 構建速度快：能夠快速的制造生物組織/器官，保證了生物材料的存活率，從而顯著有利于再生醫藥、器官移植等未來醫學領域。

4. 可以按需制造出符合個體需求的單個器官或組織，真正實現醫學的個性化需求。

6、相關案例參考 
（1）Lenke Horva Yuki Umehara Corinne Jud et al. Engineering an in vitro air-blood barrier by 3D bioprinting Nature22 January 2015
2015年Nature雜志專門刊發RegenHU BioFactory的應用文章，介紹其在構建體外血液-空氣組織屏障方面的應用
研究人員成功利用BioFactory的打印精度優勢，采用內皮細胞和上皮細胞構建了肺泡體外三維模型，為研究血-空氣屏障的體外組織提供了非常好的途徑。


圖4-8 相比于手工構建，生物打印的組織細胞生長均勻，可以快速成層生長，形成不同細胞層組成的組織結構

（2）Kesti M Müller M Becher J  et al. A versatile bioink for three-dimensional printing of cellular scaffolds based on thermally and photo-triggered tandem gelation. Acta Biomater. 2015 Jan;11:162-72 


圖4-9通過共混溫敏性聚合物聚-N-異丙基丙烯酰胺接枝透明質酸與甲基丙烯酸酯化的透明質酸，將其作為支架材料進行生物打印測試，結果顯示其對于細胞具有良好的生物相容性。其形成的三維結構在打印后可以快速凝膠化，同時保證長期的機械性能穩定。在應用牛軟骨細胞進行測試后，顯示流變性能，溶脹行為都達到要求，生物相容性良好。 
（3）Carrel J-P Wiskott AMoussa M Rieder P Scherrer SDurual S. A 3D printed TCP/HA structure as a new osteoconductive scaffold for vertical bone augmentation.Clin. Oral Impl. Res. 00 20141–8. 

圖4-10利用磷酸三鈣和和羥基磷灰石3D打印多孔骨細胞生長支架，其具有良好的孔隙度和互聯互通性能，特別符合成骨細胞生長。在羊顱骨模型測試中，證明其可以很好地促進皮質骨的縱向生長。相比于現有的骨替代材料，三維打印的多孔骨細胞生長支架可以提高垂直骨生長過程，植入羊顱骨模型顯示其產生的新骨量比顱骨高3 mm，骨量比標準的材高四倍以上，顯示其具有更好的骨生長傳導性（osteoconductivity）。

BioINK? / OsteoINK?生物材料介紹
瑞士RegenHU公司提供2種不同型號的打印水凝膠BioINK? / OsteoINK? 
BioINK? / OsteoINK?對于大量細胞的種植、細胞和組織的生長、細胞外基質的形成、氧氣和營養的傳輸、代謝物的排泄以及血管和神經的內生長均有良好的表現。

圖7-1 BioINK? / OsteoINK?生物材料
BioINK? / OsteoINK生物材料的優勢

1. 
   

• 較好的可降解性及降解速率；

• 較好的材料機械力學強度；

• 支架具有*適孔徑分布和孔隙率，孔隙率高(≥90%) ；

• 生物相容性好，生物降解后可完全吸收；

• 生物打印相容性好，打印后可以快速固化。

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